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全自动OpenSPR-XT分子互作仪

发布时间:2018-08-28 浏览次数:2503信息来源:openSPR-XT nicoya文章作者:openSPR-XT nicoya

Nicoyalife成立于2014年,是滑铁卢大学科技孵化器重点培养的纳米科技公司,并获得加拿大政府创新资金支持。Nicoyalife致力于纳米光子学基础上的传感器技术研究,并推出创新的ILSPR专利技术*,为基础研究,药物研发及医学诊断提供高灵敏的蛋白及分子互作分析仪器。美国专利号: US8693003 B2

OpenSPR-XT将为科研及工业用户带来一款全自动,高通量的分子binding动力学SPR分析仪,大大加速用户的研发过程。OpenSPR突出的性能和极具吸引力的价格,将彻底颠覆目前的全自动SPR市场。

OpenSPR-XT拥有先进的纳米传感器技术,以广受赞誉的OpenSPR作为检测基础,结合自动化工作站,提供高质量的分子互作数据,如binding动力学,吸附和蛋白,抗体,核酸,小分子等的特异性

应用举例:

多肽和钙调蛋白结合动力学分析

钙调蛋白CaM是一种能与钙离子结合的蛋白质。OpenSPR用来检测野生型CaM和NOS肽的结合、解离速率及亲和力。使用TraceDrawer 软件处理数据,解离速率Koff:3.34x10-4 s-1 结合速率Kon 1.56x105M-1s-1、亲和力常数KD 2.20 nM。结果与之前文献报道的亲和力常数相符。

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前列腺特异抗原(PSA) 和抗体 (anti-PSA) 高亲和力相互作用动力学分析

在很多研究领域中需要测定抗原-抗体结合动力常数。OpenSPR 方便用户更准确测定配体-抗原的结合动力学。OpenSPR用来测定前列腺特异抗原(prostate specific antigen ,PSA) 和抗体 (anti-PSA)的相互作用。PSA结合数据动力学拟合,得到解离速率Koff和结合速率Kon分别为

1.8x10-4 (+/-2.1x10-6) s-1,4.03x104(+/-9.16x102) M-1s-1,亲和力KD为4.5nM.如图1和图2,与之前文献报道的PSA和anit-PSA相互作用数据一致。

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由于相互作用解离速率慢,需要进行单独的解离实验。分3次加入300nM PSA,平均反应为70pm +/-2.3pm,  传感器反应的重复性为 CV =3.2% 如右图。

以上结果表明 OpenSPR可以准确测定抗原抗体相互作用的动力学速率。

 

SPR分析生物素-链霉亲和素相互作用

链霉亲和素streptavidin 和 生物素biotin 的结合结果总结在Table 1 和 Figure 1中。当streptavidin流过生物素化的传感器表面,存在显著浓度依赖。由于streptavidin 和 biotin结合的高亲和力,没有观察到解离过程。 1 nM低浓度时(18 pm response)观察到表明OpenSPR仪器的高灵敏性。1min内信号的标准方差小于 2 pm,揭示了优异的信噪比。

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对照实验(Figure 2) 表明没有biotin结合到表面上时, 500 nM 和 1000 nM时,streptavidin结合很少。然后用biotin激活表面,观察到streptavidin结合。确认传感器是有活力的。

Streptavidin和金颗粒非特异结合,但running buffer的组成可以有效抑制任何非特异结合。

这些结果表明biotin-streptavidin 对于 OpenSPR系统使用者来说是个很优异的分析体系。


用户评价例

推出仅一年,OpenSPR已经服务于北美地区30多位用户,包括北卡大学,夏威夷大学,亚利桑那州立大学,多伦多大学,滑铁卢大学,麦克马斯特大学等,得到用户高度称赞。

“The OpenSPR is a very versatile and affordable system that has allowed us to accurately measure protein-protein and protein-peptide interactions without the need to label the interacting molecules. It is user-friendly, versatile and the sensor chips are not very expensive. Both graduate and undergraduate students have used the instrument to generate reliable data.”

Dr. Guy Guillemette   University of Waterloo

 

“Unlike traditional spectrophotometers, OpenSPR and its user-friendly software allow us to acquire data at faster rates in real time. The dual spectrophotometer function allows us to characterize nanoparticles in free solution with minimal post processing. OpenSPR’s versatility is very important for our research.”

Dr. Vladimir Kitaev    Wilfrid Laurier University

 

参考文献

Stable ligand-free stellated polyhedral gold nanoparticles for sensitive plasmonic detection  Nanoscale, 2016,8, 2575-2583